Сьогодні у нашій корисній рубриці для лаборантів публікуємо пам’ятку про складні методи фарбування мазків. Збережіть собі!

Існує ряд способів фарбування:

Фарбування за Грамом

1. На фіксований препарат накладають клаптик фільтрувального паперу, на який наливають карболовий розчин генціанвіолету на 1-2 хв (у модифікації Синьова використовують суху смужку фільтрувального паперу).
2. Барвник зливають і, не промиваючи препарат водою, наливають розчин Люголя на 1 хв.
3. Знебарвлюється за допомогою спирту протягом 1-2 хвилин.
4. Промивається водою.
5. Протягом 1-2 хвилин дофарбовується розчином фуксину.

Цей метод фарбування є дуже важливим під час діагностики. Всі бактерії за цим способом діляться на грампозитивні (темно-фіолетовий колір) та грамнегативні (червоний колір). У грампозитивних бактерій в клітинній стінці відсутні ароматичні і сірковмісні амінокислоти, відзначається низький вміст ліпідів; у грамнегативних, навпаки, ці речовини містяться у великій кількості.

Фарбування за Цілем-Нільсеном

1. Воно призначене для розрізнення кислостійких бактерій від некислостійких.
2. Мазок фарбують карболовим фуксином Ціля під час нагрівання протягом 3-5 хв.
3. Знебарвлюють розчином сірчаної кислоти.
4. Промивають водою.
5. Дофарбовують 3-5 хвилин метиленовим синім.
6. Кислостійкі організми матимуть рубіново-червоний колір, некислостійкі – блакитно-синій.

Фарбування за Ожешком

Від попереднього методу воно відрізняється тим, що як протрава тут використовується розчин соляної кислоти, який розрихлює спори, погано приймає барвники. Після цього зразок можна фарбувати за методом Ціля-Нільсена. Цитоплазма клітини матиме синій колір, а спори – червоний.

Фарбування за Нейссером

Воно використовується для виявлення зерен волютину. 
1. Мазок фарбується оцетокислим метиленовим синім на 4 хвилини, після чого фарба зливається.
2. Далі промивається розчином Люголя протягом 20-30 секунд.
3. Не промиваючи водою, фарбується везувіном протягом 1-3 хвилин.
4. Промивається водою, висушується.

Фарбування за Буррі

Цей метод вважається негативним, оскільки профарбовується фон, а не самі мікроорганізми. Для цього використовуються фарбники, які не профарбують бактерії, наприклад туш. Для цього готується тушевий препарат: краплю матеріалу змішують з краплею туші, готують мазок і висушують.

Фарбування за Морозовим

Цей метод призначений для виявлення вірусів, а також мікроструктур бактерій, джгутиків та гранул. Суть методу полягає в тому, що при обробці аміачним розчином срібла сіль у зразку відновлюється, а специфічні інгредієнти об’єкта набувають коричнево-чорного кольору.

Фарбування за Романовським-Гімзе

Цей метод вважається універсальним. Під час фарбування найпростіших їхня цитоплазма стає блакитною, а ядра – фіолетовими. Такий метод використовують для дослідження спірохет, хламідій, формених елементів крові.

Фарбування за Вейгертом

Воно призначене для виявлення еластичних волокон насамперед у судинах. Для цього методу використовуються такі реактиви: розчин перманганату калію, активований кислотний буфер, розчин щавелевої кислоти, диференціювальний кислотний буфер, розчин резорцин-фуксину, спиртовий розчин для інкубації.

1. Депарафінований зріз помістити в дистильовану воду.
2. Нанести 10 крапель реактиву А на 5 хвилин (для виявлення еластичних волокон безпосередньо у судинах) або нанести 5 крапель реактиву А на 5 хвилин і 5 крапель реактиву В на 5 хвилин.
3. Промити у дистильованій воді.
4. Нанести 10 крапель реактиву С на 5 хвилин. Для виявлення еластичних волокон у судинах на дно місткості для інкубації налити 20 крапель реактиву В, помістити препарат в місткість, попередньо нанісши на зріз 10 крапель реактиву С, закрити ємність й інкубувати 30 хвилин.
5. Промити в дистильованій воді.
6. Помістити в реактив D, закрити місткість й інкубувати протягом ночі. Розчин після використання повернути в оригінальну місткість. Для виявлення еластичних волокон у судинах нанести 10 крапель реактиву D на 2 хвилини.
7. Промити в дистильованій воді.
8. Промити у водопровідній воді.
9. Нанести 10 крапель реактиву Е на 5 хвилин.
10. Дегідратувати, просвітлити, закрити.
Кінцевий колір – від темно-синього до коричнево-червоного.

І не забувайте, що для точності результатів фарбувань треба використовувати лише перевірені та якісні реагенти!

***
Медринок. Лабораторні реактиви, медтехніка, комплектуючі
medrynok.com.ua
(093) 39-44-959
(096) 16-12-494